Supstrat – u biohemiji – je definiran kao molekula na koju djeluje enzim. Svakom enzimu odgovara jedan ili više supstrata sa aktivnim mjestom, za koje se veže, tvoreći tako kompleks enzim-supstrat. Enzim katalizira odvijanje hemijsku reakciju koja mijenja supstrat u drugu molekulu koja se naziva produkt. Produkt se zatim odvaja i oslobađa od aktivnog mjesta na enzimu koji je onda spreman za vezanje slijedeće molekule supstrata.[1][2][3]
U nekim slučajevima, jedan enzim je, na svoje aktivno mjesto, sposoban vezati više od jednog supstrata. Supstrati se tada najčešće vežu za aktivno mjesto po tačno određenom redoslijedu, prije početka hemijske reakcije i stvaranja jednog ili više produkata.
Opća formula enzimski katalizirane kemijske reakcije je slijedeća:
E = enzim;
S = supstrat;
ES = kompleks enzim-supstrat;
EP = kompleks enzim-produkt;
P = produkt.
Jedina nepovratna reakcija je ona u smjeru ES → EP. Enzimska reakcija obično slijedi Michaelis-Mentenovu kinetiku, izuzimajući alosterične enzime. Reakcija se stoga ubrzava s povećanjem koncentracije supstrata u otopini koja povećava vjerovatnoć vezanja supstrata na aktivno mjesto, sve dotl dok se sva aktivna mjesta ne zasite. U tom slučaju brzina reakcije ne ovisi više o koncentraciji supstrata, već o koncentraciji enzima.[4][5][6]